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          固相萃取儀如何操作呢?

          更新時間:2022-07-05點擊次數:990
          固相萃取儀的使用:
          1.活化
          固相萃取儀萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml溶劑沖洗濾膜使SPE填料保持濕潤,因為填料干燥會降低樣品保留值,而各小柱的干燥程度不一,也會影響回收率的重現性。先用甲醇等水溶性有機溶劑沖洗填料,因為甲醇能潤濕吸附劑表面,并滲透到非極性的硅膠鍵合相中,使硅膠更容易被水潤濕;然后再加入水或緩沖液沖洗,創造和樣品溶劑相容的環境并提高回收率。
          2.上樣
          ①用0.1mol/L酸或堿調節,使pH=9,離心取上層液萃??;
          ②用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質后取上清液,以水或緩沖液稀釋后萃??;
          ③用酸或無機鹽沉淀蛋白質后取上清液,調節pH值后萃??;
          ④超聲15min后加入水、緩沖液,取上清液萃取。流速應控制為1ml/min,流速快不利于待測物與固定相結合。
          3.淋洗
          反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液,可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調節pH值。加入小柱的清洗液應不超過一個小柱的容積,而SPE濾膜為5-10ml。
          4.洗脫
          應選用5-10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度,則可先將洗脫液揮干后,再用流動相重組殘留物后進樣。體內樣品洗脫后多含有水,可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測物,再用極性較強的HPLC分析柱如C18柱分析洗脫物。

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